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今日說明:試驗時怎樣挑選到適合自己試驗的抗體呢?
更新時間:2020-09-01   點擊次數(shù):1418次

抗體關(guān)于特異性的挑選:特異性的挑選首要需求考慮四個方面:蛋白特異性、種屬特異性、試驗辦法特異性、符號物的特異性。

1、蛋白特異性:針對需求檢測的蛋白查找抗體,幾個細節(jié)要差異,重組表達的蛋白和內(nèi)源性蛋白的檢測,對抗體的要求是不相同的,留心查看抗體說明書的檢測說明。假定重組蛋白不是全長表達,則需求留心抗體的免疫原區(qū)域是否在重組蛋白區(qū)域內(nèi)。

2、種屬特異性:同種蛋白不同物種,有著或大或小的差異。現(xiàn)在大部分商品化抗體都是以人源蛋白序列為模板重組蛋白或規(guī)劃多肽抗原的,依據(jù)蛋白的同源性的情況與其他種屬發(fā)作穿插反應。需求參照說明書注明的可反應種屬信息。一些稀有種屬很難找到抗體,可以經(jīng)過蛋白的序列比對,挑選同源序列免疫的抗體。

3、試驗辦法特異性:現(xiàn)在運用抗體的試驗辦法有許多,不同的運用辦法過程中,由于對蛋白樣品的處理辦法不相同,蛋白的含量有差異,對抗體的辨認表位和效價要求都是不相同的。詳細的依據(jù)說明書注明的產(chǎn)品應用辦法進行挑選。

4、符號物的特異性一般依據(jù)試驗操作的試驗辦法不會運用帶有符號的一抗,比方WB、IHC等,都是經(jīng)過二抗類的試劑符號抵達作用呈現(xiàn)的目的。但是依據(jù)儀器分析的一些試驗,或許就會運用到直接符號的一抗,比方流式試驗。那么需求了解到自己行將運用的儀器能檢測到的熒光規(guī)模,不通的參數(shù)要求挑選對應的符號物。在免疫熒光雙標試驗中,需求選配不同的熒光物。

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